lunes, 3 de octubre de 2022
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Que el tamaño no sea un problema: Minicircle DNA vector technology
SBI - SYSTEM BIOSCIENCES

Si quieres expresar tu gen de forma transitoria pero duradera en el tiempo (hasta 14 días*), liberarte de todos los restos de DNA bacteriano que hay en los plásmidos y aumentar la eficiencia de transfección ¡los Minicircles son tu opción!

Son plásmidos episomales de pequeño tamaño (2-5kb) generados a partir de un plásmido parental (PP) por la actuación de la integrasa ФC31. (Fig 1).

Ese PP se transforma en la cepa Ecoli ZYCY10P3S2T donde, mediante la adición de Arabinosa, se activa ФC31 y la endonucleasa SceI. Del PP se originan dos mini plásmidos (1) el Minicircle que lleva solo el promotor y el gen de interés y (2) otro con el resto de información de la bacteria. Este último se degradará por la acción de la endonucleasa.


Fig 1. Generación de MC a partir de un plásmido parental.

Existen diversos tipos de PP, para expresar shRNA o cDNA, con varios promotores y/o marcadores (RFP o GFP) además de controles positivos y bioluminiscentes. Cuéntanos que necesitas y te lo enviamos.

*Depende de tu línea celular.